探討ENO1 (α enolase)在乳癌細胞中所扮演之角色與Tamoxifn 活化ENO1(α enolase) 蛋白表現之機制

ENO1是一個存在於細胞質的糖解作用酵素，主要功能在於催化phosphoenolpyruvate 形成。但在近幾年的研究中指出ENO1是一個多功能性蛋白，在哺乳動物中，目前發現三種不同的isoform，分別為enolase-α(ENO1)、enolase-β(ENO3)、enolase-γ(ENO2)。ENO1存在於大部份的組織中，ENO2、ENO3主要存在於神經細胞或肌肉細胞中。這一些isoform是具有組織特異性的，它們一般以homodimers 或heterodimers 形式作用，使2-phosphoglycerate 變成 phosphoenolpyruvate。ENO1跟c-myc binding protein 1(MBP-1) 來自於相同的一個基因，經由不同的轉譯修飾過程所產生。在本實驗中我們證實Tamoxifen 在MCF-7細胞中，可以活化ENO1蛋白之表現，實驗中我們也有發現Tamoxifen 活化NFκB、ER α、ER α p118等蛋白之表現。在尋找轉錄因子結合位的Database(TFSEARCH: Searching Transcription Factor Binding Sites)上，我們發現到ENO1 轉錄調控區有轉錄因子NFκB的結合位。核質分離技術證實加入Tamoxifen可以使NFκB被活化，而進到細胞核裡面。接著使用NFκB的活化抑制劑PDTC，發現到當NFκB被抑制之後， ENO1的表現量下降了。在此我們證實Tamoxifen可以經由轉錄因子NFκB，結合到ENO1的轉錄調控區，因而活化ENO1蛋白之表現。利用即時性PCR(Real-time PCR)定量mRNA 的表現量，發現腫瘤組織中ENO1的表現量有明顯高於正常組織中的ENO1。在乳癌病人的病理切片中，我們有發現到在乳癌病人的乳腺管癌化的細胞中表現量比較多。因此我們認為ENO1 乳癌細胞中大量表現，一定具有臨床上的意義。