研發創新Protein G微米球以提升抗體於酵素免疫吸附測定法(ELISA)、西方墨點法(Western Blot)之偵測極限值

在傳統的生物醫學實驗上，常使用酵素免疫吸附測定法(ELISA)及西方墨點法(Western Blot)作為臨床醫學檢測的工具。ELISA和Western Blot皆是應用抗原與抗體專一性結合的特性，然而，目前所遭遇的困境為抗體偵測效率不足的問題。為了改善此難題，我們研發一款新型大腸桿菌(Escherichia coli : E. coli) 細胞膜上表現Protein G之細菌微米球，Protein G可以有效將偵測的抗體結合在微米球表面，形成一個抗體微米球 (簡稱為Protein G微米球) ，以提升抗體在ELISA及Western Blot的偵測敏感度。目前我們已在實驗室中研發出表現單一Protein G之細菌株(BL21/pET1G)和8個Protein G重複單元之細菌株(BL21/ pET8G)的細菌微米球。經由Western Blot證實BL21/ pET1G及BL21/ pET8G E. coli細菌皆正確表現Protein G或8重覆Protein G，且利用ELISA證實BL21/ pET8G抓取抗體的效率是BL21/ pET1G的10倍。此外 ，於ELISA實驗中證實無論是將細菌株保存於4oC或-80oC，經過40天後，仍不影響Protein G細菌微米球抓取抗體的功能。此細菌微米球的產量豐富、快速且方便，且能讓Protein G細菌微米球的生產品質均一，未來，可廣泛運用在ELISA或Western Blot及其他生物醫學相關實驗上，相信可大大提升偵測抗體的訊號量，以改善舊有實驗方式，加速實驗進行並節省實驗成本，進而成為一種強勁的免疫偵測工具。