探討新型CLK4抑制劑在人類膽管癌中對 mRNA 剪接的藥理作用機制

膽管癌為發生於膽管上皮細胞的癌症，由於早期無症狀及高度侵略性，導致其發生率與死亡率持續偏高。此外，因診斷困難進一步限制治療選擇並影響預後，面對這些挑戰，新藥開發已成為迫切需求，其中RNA splicing異常已被證實與膽管癌病理機制密切相關，影響了細胞生長、分化、凋亡與訊號傳遞，這類異常不僅揭示了疾病進展的分子基礎，亦提供新的標靶治療策略。CLKs kinase作為重要激酶，能夠藉由磷酸化SR蛋白質進而調控RNA剪接，進一步影響腫瘤生成、轉移及惡化。本研究中透過CRISPR-Cas9基因剔除技術，將膽管癌細胞剔除CLK4基因後，其腫瘤生長速率明顯下降，證實CLK4對於腫瘤生長扮演關鍵角色，並以CLK4為靶點，開發影響RNA選擇性剪接機制之抑制劑，提升膽管癌的治療成效。研究中使用docking model及深度學習的方式設計與合成有效抑制CLK4活性的抑制劑，並進行細胞及動物實驗驗證其確效性。TMU-K-0506作為新穎性的CLK4抑制劑，能夠抑制SR蛋白質的磷酸化，進而調控選擇性剪接，並影響基因表達。此外，TMU-K-0506亦證實透過誘發caspase路徑造成細胞凋亡，有效抑制人類膽管癌HuCC-T1及RBE細胞生存活。根據定序結果顯示，TMU-K-0506有效影響G2/M期及p53路徑相關基因之選擇性剪接，進而調控基因表現並抑制癌細胞生長。此外，TMU-K-0506與化療藥吉西他濱合併使用時呈現出協同作用，且在腫瘤動物模式中明顯延緩腫瘤生長，顯示其具備做為合併治療策略之臨床應用價值。本篇研究不僅證明了TMU-K-0506能夠調控RNA選擇性剪接並抑制癌細胞生長，同時也證明了CLK4抑制劑能夠作為一個新型的膽管癌治療策略並改善治療效果。