雌二醇與尼古丁透過PI3K/Akt和MAPK訊息傳遞路徑促進MCF-7人類乳腺癌細胞中尼古丁受器nAChR alpha9 基因表現的機制探討

本研究主要目的是探討乳癌、雌性素、尼古丁三者的關聯性。欲知雌二醇和尼古丁如何調控MCF-7乳腺癌細胞株中尼古丁受器nAChR alpha9的基因表現與兩者在細胞內共同的訊息傳遞路徑，並且尋找主要影響尼古丁受器基因轉錄的轉錄因子。當MCF-7細胞株給予生理濃度的雌二醇 ( 1 nM ) 和尼古丁 ( 10 microM ) 時，其尼古丁受器的mRNA可在48小時後明顯增加。而在細胞訊息傳遞方面：使用PI3K抑制劑LY 294002，以及MAPK抑制劑PD 98059和SP 600125，可抑制住兩者共同的訊息傳遞路徑。因此歸納出兩者共同訊息傳遞路徑為PI3K/ Akt/p-ER alpha( Ser 167 ) 以及MEK1,2/ ERK1,2/ JNK1,2/p-ER alpha ( Ser 118 ) 。此外，運用Serial deletion luciferase activity assay和Site-directed mutagenesis assay發現雌二醇影響尼古丁受器基因轉錄的轉錄因子結合位置為VDR和AP-1，而尼古丁影響尼古丁受器基因轉錄的轉錄因子結合位置為AP-1。