建立腫瘤轉移促進因子TWIST1之抑制藥物篩選方法

根據世界衛生組織在2011年統計顯示，癌症是全世界主要死亡原因之一。我國行政院衛生福利部統計的報告指出，民國99年國人死亡原因第一名為惡性腫瘤。近年來發現，癌症發生的其中一個原因是因為基因調控的異常。癌症之惡化終致病人死亡之原因是由於癌症的轉移。而TWIST1在癌症演化過程當中，扮演促進轉移的致癌基因角色。且TWIST1的表現量與癌症預後差有關，在許多癌症都發現有大量表現的情形，包括乳癌、大腸癌、前列腺癌、肺癌，子宮癌和肝癌。TWIST1是一個鹼性螺旋-環-螺旋 (basic Helix-Loop-Helix; bHLH) 構造的轉錄因子 (transcription factor)。此類的結構會形成異雙體 (heterodimer)，與DNA上特定的E-Box (CANNTG)序列結合，而影響下游基因表現。因此，我們以此基因為標靶，建立找尋TWIST1抑制劑之方法。為了從中醫藥資料庫 (57,423個化合物)、drug bank已核准的藥物 (1,490個藥物)以及臺北醫學大學生藥所 李宗徽 教授以及臺北醫學大學藥學系 李慶國 教授實驗室所提供中草藥純化分離而得的化合物結構，快速篩選出TWIST1抑制劑，因此建立虛擬篩選 (Virtual Screening)的方式及建立三種細胞模型對TWIST1有專一性的細胞，以便篩選出具有潛力的TWIST1抑制劑。利用所建立的細胞模型，先利用報告質體的細胞篩選得SAHA為TWIST1候選抑制劑。再利用大量表現TWIST1及敲除TWIST1的細胞模型檢測TWIST1下游基因Bmi1 的mRNA表現量有下降的趨勢，進而影響EMT的重要因子E-cadherin (CDH1)的mRNA表現量上升，因此SAHA可能為新穎之Twist1抑制劑。