以聚合酶連鎖反應與西方墨點法偵測B型鏈球菌之表面免疫性蛋白

B型鏈球菌 (Group B Streptococcus, GBS,又稱Streptococcus agalactiae) ，為小兒感染的重要致病菌，主要經由帶菌的產婦傳給新生兒，因而造成嚴重的侵襲性疾病。B型鏈球菌的致病機轉仍不清楚，可能與其表面蛋白 (surface-associated proteins) 有關，被視為革蘭氏陽性球菌重要的致病因子。Surface immunogenic protein (Sip)，為表面蛋白的其中一種，存在於B型鏈球菌九種血清型中，為了偵測B型鏈球菌，我們使用Sip作為研究標的，希望藉由Sip的偵測來發展B型鏈球菌臨床檢驗試劑。因此在本次研究中，共收集了77株細菌，包括43株革蘭氏陽性細菌，與34株革蘭氏陰性細菌，首先以聚合酶連鎖反應 (Polymerase Chain Reaction, PCR) 偵測77株細菌的sip gene，此外也利用實驗室純化出的Sip蛋白來免疫產蛋母雞，萃取出雞蛋中的蛋黃免疫球蛋白 (IgY) ，再以此抗Sip抗體來進行西方墨點法 (Western blot) 試驗，篩檢細菌的Sip蛋白。實驗結果顯示，在所有進行PCR試驗的細菌中，13株Streptococcus agalactiae的sip gene皆呈現陽性結果，而其它64株細菌則都為陰性。而以西方墨點法偵測細菌的Sip蛋白部份，除了13株Streptococcus agalactiae為陽性外，另有2株革蘭氏陽性菌也同為陽性結果，分別為Streptoccus anginosus與Arcanobacterium haemolyticum， 此兩者在PCR結果為陰性，故推測可能為非特異性反應。由研究結果我們可以得知，對於B型鏈球菌的偵測，sip gene是一個具有高度特異性的標的基因，且實驗室所純化出的抗Sip抗體，在抗原的偵測上也具有良好的表現，因此未來將可應用於B型鏈球菌的基因與抗原相關檢驗，以快速且正確的檢測B型鏈球菌，以期能預防新生兒侵襲性疾病的發生。