評估插管小鼠經靜脈及口服多次劑量投與質體DNA (pMBP-Lac Z) 聚合微膠體溶液之藥物動力學

發展一個新的基因載體，評估其質體DNA 及質體DNA 與載體之複合物，在體內之組織分佈情形是必要的。而本次實驗所利用的質體DNA，為帶有寡樹突神經細胞上的特殊蛋白質基因 - 髓鞘基質蛋白質 (myelin basic protein, MBP)基因的啟動子之pMBP-Lac Z，評估經由靜脈及口服投與三個劑量pMBP-Lac Z
(40?g DNA/150 ?L) 與pMBP-Lac Z 聚合微膠體溶液到插管小鼠，其體內
pMBP-Lac Z 之藥物動力學參數及體內之分佈情形。血液及組織檢品利用即時聚
合酶連鎖反應法 (Q-PCR) 分析檢品中pMBP-Lac Z 含量。實驗初步結果顯示，
在頸靜脈投與(IVJ)三次總劑量後之血液檢品中發現，pMBP-Lac Z (P) 之曲線下
面積(area under the curve, AUC) 為1.56 x 1012 (min x copies/?L)，投與pMBP-Lac
Z 聚合微膠體溶液 (P/PM) 之AUC 為5.29 x 1011 (min x copies/?L)。而排除半衰
期的部份，投與P 為436 分鐘，投與P/PM 為344 分鐘。經由尾靜脈投與 (IVT)
P/PM 後的血中濃度曲線圖發現， AUC 為5.12 x 1011 (min x copies/?L)，其半衰
期為97 分鐘。口服投與三個劑量的P/PM，其AUC 為1.73 x 107 (min x
copies/?L) ，半衰期為58 分鐘。利用IVJ 和IVT 投與單一劑量P 和P/PM 的5, 30
和60 分鐘後，觀察到DNA 主要分佈於心臟、肺臟、腦、脊髓和腎臟等高血流
的組織，若經由口服投與P 和P/PM 後，以十二指腸及胃部組織為主要分佈組織。
此外，體外DNase 安定性試驗發現，PM 存在下確實能對DNA 有保護效果，而
pMBP-Lac Z 在體外的血漿安定性試驗發現，不論是P 或P/PM 之安定性，在20
分鐘都已觀察不到完整之pMBP-Lac Z 存在，若是胃沖洗液的安定性試驗，則是
P 或P/PM 皆在60 分鐘才開始出現DNA 片段。綜合以上結果，體內實驗發現，
不同投與途徑下確實會影響其體內的組織分佈情形。