探討Phospholipase D 在人類血小板活化中所扮演的角色

Phospholipase D (PLD)是phospholipase superfamily 中的一種酵素酶(enzyme) 。PLD 能夠水解phosphatidylcholine (PC) ， 產生phosphatidic acid (PA)和choline。其中PA 為二級傳訊因子(second messenger)，在細胞中被認為是PLD 的主要功能，許多報導已指出 PLD 參與許多生物過程和疾病，如癌症(cancer)、免疫(immunity) 和 阿茲海默症(Alzheimer's disease)；另外，PLD 在小鼠血小板活化中亦扮演調節的角色，然而，PLD 對人類血小板活化的作用仍不清楚。因此，在本論文我們將研究PLD 是否參與在人體血小板活化和血栓形成。
在本篇研究中，我們研究數據顯示PLD1 抑制劑VU0155069
(VU1，10-25 μM)和PLD2 抑制劑VU0364739 (VU2，10-25 μM)都有
效地抑制各種刺激劑所誘導的人類血小板的凝集，VU1 和VU2 亦會
抑制由thrombin 所誘導的P-selectin 表現和ATP 釋放；而且，VU1 和VU2 能顯著地抑制由thrombin 誘導的p38 MAPK、ERK、JNK 和Akt
的蛋白質磷酸化。另外，由我們研究數據顯示，VU1 和VU2 能顯著
抑制clot retraction、platelet spreading 和adhesion；除此之外，使用一個模擬體內血栓形成的血小板功能分析儀來做檢測，發現同時給予PLD1 和PLD2 抑制劑可以協同地延長阻塞時間，這些結果顯示PLD1和PLD2 對於人類血小板活化是必需的。有趣地，由上述人類血小板所獲得的結果，不同於先前研究的小鼠血小板，這也暗示PLD 可能在人類和小鼠所扮演的角色是有差異的，類似於小鼠先前研究，我們動物實驗結果顯示，PLD1 能顯著地減緩ADP 所誘導的小鼠急性肺血栓形成和中大腦動脈血管阻塞/再灌流模式所誘導的腦損傷；此外，PLD1 和PLD2 這兩個抑制劑皆不會造成出血的副作用。
總結以上結果，本研究首次證實PLD1 和PLD2 兩者能協同地調控人類血小板活化和血栓形成，並得知PLD 在人類和小鼠所扮演的角色是有差異的；此外，我們的研究結果顯示PLD 可以當作一個安全的預防血栓相關疾病的治療標的。