以HDAC家族蛋白基因編輯探討合併使用EGFR-TKI在非小細胞肺癌中的治療效果

根據最近世界衛生組織國際癌症研究機構(International Agency for Research on Cancer, IARC)所發布的資料統計指出直到2020年，肺癌不僅一直高居癌症發病率第一，同時也位居癌症死亡率第一，而其中又以肺腺癌為肺癌中比例最高的一種癌症。而在先前的研究中已經指出在許多肺癌中都有大量表現EGFR，但長期使用針對EGFR的標靶藥物經常伴隨藥物耐受性增加的問題，因此有許多研究的目標在於克服EGFR-TKIs的藥物耐受性效果，並且同樣的有許多的研究指出，在不同的癌症細胞上有不同程度的組蛋白去乙醯酶(HDAC)表現差異，而本研究希望透過結合基因治療的方式，給予解決EGFR-TKIs的藥物耐受性的藥物施用標的。為了知道HDAC的哪種類型對於肺腺癌細胞是相對重要的，因此首先我們準備了HDAC1~11的基因剔除細胞株，透過使用基因剔除技術CRISPR/CAS9為基礎製作的CRISPR病毒來感染Hcc827肺腺癌細胞，對HDAC進行基因編輯。接著我們透過細胞生長速率實驗，發現在基因剔除HDAC2、4、5、6、7、9、11後，細胞的生長有明顯的被抑制的效果。並且在結合細胞的功能性蛋白分析後，認為HDAC2、4、5、7、9、11型可能是對於肺腺癌細胞較為重要的蛋白。為了符合臨床上對病患進行用藥的標準，我們選擇了gefitinib、及TMP195、TMP269這兩種針對第IIa類型的選擇性HDAC抑制劑，並根據結果我們發現了在剔除HDAC4及HDAC7蛋白的細胞，其IC50相較於Hcc827細胞有明顯的增加，可能揭示了抑制HDAC4、HDAC7對於施用gefitinib具有拮抗的效果。