開發抗人類上皮因子接受體第二蛋白/抗纖維母細胞/抗甲氧基聚乙二醇之三功能抗體以提升甲氧基聚乙二醇奈米藥物毒殺乳癌腫瘤之功效

近年研究發現使用臨床奈米藥物進行乳癌治療，常因腫瘤周邊纖維母細胞（tumor-associated fibroblast，TAF）提供其物理屏障，造成奈米藥物治療效果不彰。本實驗室過去已將可專一性標靶表現人類上皮因子接受體第二蛋白（human epidermal growth factor receptor 2，HER2）之乳癌細胞的乳癌專一性抗體（anti-HER2 scFv）和可標靶腫瘤周邊纖維母細胞表現之纖維母細胞活化蛋白（fibroblast activation protein，FAP）的抗纖維母細胞抗體（anti-FAP scFv），與人類化抗甲氧基聚乙二醇抗體（anti-mPEG Fab）結合，成功建立三功能抗體α-HER2/α-FAP/α-mPEG TsAb，能一步驟以非共價鍵方式結合上奈米藥物Lipo-Dox的mPEG，使Lipo-Dox能同時專一性標靶乳癌細胞和腫瘤周邊纖維母細胞。我們利用哺乳細胞量產系統(Expi293TM system)及鎳離子層析管柱（Nickel column）成功量產並純化這些抗體。以蛋白質電泳證實其蛋白質表現及摺疊皆正常；利用流式細胞儀證實三功能抗體α-HER2/α-FAP/α-mPEG可同時結合乳癌細胞及纖維母細胞；並利用ELISA證實三功能抗體可專一性結合上mPEG。重要的是，活體外細胞毒殺實驗證實，α-HER2/α-FAP/α-mPEG TsAb可提升奈米藥物(Lipo-Dox)毒殺單獨及以不同比例培養的HER2+乳癌細胞、FAP+纖維母細胞之能力。根據上述成功的結果，本研究將提供一個創新的乳癌治療策略，將三功能抗體α-HER2/α-FAP/α-mPEG TsAb與任何mPEG-奈米藥物一步驟混合反應，即可快速轉變為同時標靶HER2及FAP的奈米藥物，能有效標靶並毒殺HER2+乳癌細胞及FAP+腫瘤周邊纖維母細胞，大幅提升臨床乳癌治療之成效。