LNP-TGFβRI siRNA 降低不同階段血吸蟲誘發肝纖維化病理差異之研究

血吸蟲病是一種由血吸蟲寄生蟲引起的疾病，廣泛分布於熱帶和亞熱帶地區，其慢性感染會導致肝纖維化，進而影響肝臟功能，增加患者的死亡風險。轉化生長因子-β（TGF-β）是調控纖維化發展的關鍵細胞因子，透過促進肝臟星狀細胞的活化和轉化，加劇肝纖維化。本研究目的在探討利用脂質奈米粒子（LNP）包覆的TGFβRI小干擾RNA（siRNA）對血吸蟲病不同階段引起的肝纖維化的治療潛力。
本研究採用血吸蟲感染的小鼠模型，分別在感染後六週分別連續兩週與四週進行LNP-TGFβRI siRNA治療，於感染後八週和十週評估LNP-TGFβRI siRNA對肝纖維化程度的影響。透過組織學方法評估肝臟纖維化和肉芽腫大小的變化；肝功能生化指標評估肝功能的恢復狀況；流式細胞儀（Multi-flow）與多重酶聯免疫吸附試驗（Multi-ELISA），分析感染和治療後免疫細胞與細胞因子的分布狀況與變化；活體影像技術用於即時觀察與監控LNP-TGFβRI siRNA在小鼠體內分布狀況與治療效果。
研究結果顯示，LNP-TGFβRI siRNA治療在減輕血吸蟲病引起的肝纖維化方面效果顯著。在感染血吸蟲的對照組中，十週的肉芽腫比八週時更大，表現疾病嚴重程度的進展。而在感染血吸蟲六週後連續治療兩週與四週的結果均顯示出療效，尤其是十週的治療結果，即連續治療四週的效果更為明顯，特別是在高劑量的LNP-TGFβRI siRNA下，纖維化程度和肉芽腫大小顯著減少。此外，治療組中纖維化相關基因和蛋白的表達顯著下調，且十週有低於八週的趨勢。流式細胞儀分析結果顯示治療後Th2、Total NK、CD56d、Tc、Tc17以及Tfc細胞比例顯著下降，而Tc17在十週高劑量的組別又更顯著低於八週。Th1、Tfh細胞、單核球細胞和樹突細胞比例則在治療後顯著上升，Th1與Tfh細胞在十週高劑量的組別又顯著高於八週。透過Multi-ELISA分析細胞因子的結果表示，LNP-TGFβRI siRNA的治療改變了Th1/Th2細胞因子表現，IFN-γ、IL-1α、IL-6和IL-12（抗纖維化的Th1細胞因子）等細胞因子水平顯著增加，而十週又有高於八週的趨勢；IL-4、IL-5、IL-13（促纖維化的Th2細胞因子）、IL-2和KC等細胞因子水平顯著減少，十週也有比八週還低的趨勢。肝功能指標分析顯示，ALT和AST水平在治療後有降低的趨勢。毒理試驗顯示，LNP-TGFβRI siRNA在所測試的劑量範圍內未引起明顯的副作用。透過超音波與CT的活體影像技術進一步驗證了治療效果，顯示出肝臟纖維化的顯著改善，肝實質密度和均勻度顯著恢復。
本研究證明了LNP-TGFβRI siRNA能夠有效減輕血吸蟲病不同階段引起的肝纖維化，尤其是較長時間給予高劑量的藥物效果更佳。這一發現為開發新型抗肝纖維化治療方法提供了重要依據，顯示了針對TGF-β訊號路徑的干預在治療血吸蟲病引起的肝纖維化中的潛力。未來研究將可進一步探討LNP-TGFβRI siRNA的最佳劑量、最佳治療時間點以及長期安全性，並評估此藥物在肝纖維化臨床治療應用的可能性。