分子選殖RGS11基因及探討其在肺癌中所扮演之角色

G蛋白信號傳導調節因子(regulator of G-protein signaling；RGS)為包含一個120-125個胺基酸之RGS domain保守序列的家族，其具有GAP(GTPase acceleration protein)之活性。至今在哺乳類中已發現有30多種RGS蛋白，共分為8個亞族，而RGS11屬於其中之R7亞族。 在許多細胞外引發細胞內生理功能改變之G蛋白訊息傳遞路徑中，RGS扮演着負調控因子的角色，終止訊息之傳遞。根據先前文獻報導，GNB5可增加RGS蛋白之表現，而且至今尚無RGS11與肺癌轉移之相關報導。本實驗使用兩種不同侵襲能力之肺癌細胞株模型：一種是CL1-0細胞，屬於低侵襲能力肺腺癌細胞株；另一種是CL1-5細胞，屬於高侵襲能力肺腺癌細胞株。首先利用RT-PCR方法，確認CL1-5細胞之RGS11基因表現量明顯高於CL1-0細胞。再利用分子轉殖技術完成建構RGS11和GNB5質體，透過轉染技術過量表現RGS11和GNB5於CL1-0細胞，進一步利用Transwell migration assay，觀察細胞爬行(cell migration)之蛋白功能分析。其結果顯示，當單獨表現RGS11或GNB5蛋白於CL1-0細胞時，其造成之生物功能不具有顯著性。然而同時表現RGS11和GNB5蛋白時，造成CL1-0細胞之爬行數量顯著增加。Western blot之結果顯示，若單獨表現RGS11或GNB5，並無過量表現其蛋白。但同時轉染RGS11和GNB5於CL1-0細胞時，RGS11蛋白可明顯地過量表現。依據本實驗的結果已明確顯示，RGS11與肺癌轉移之間有著密切相關性，更進一步了解肺癌轉移之機轉，將可提供為直接作用於調節G蛋白之肺癌新藥開發的一個重要標靶。