台灣三種海洋細菌醱酵液之生物活性成分研究

本研究利用瓊脂擴散法 (disc agar diffusion method) 來篩選105株台灣海洋細菌，藉以尋找出對抗藥性金黃色葡萄球菌 (Penicillin G-resistant Staphylococcus aureus, ATCC 11631 ) 具有抑制活性的海洋細菌。所得結果根據抑菌圈的大小判斷其中2株具較明顯的抑制活性，分別為#M1B (Pseudomonas aeruginosa) 和#AW52 (Rhodobacteraceae)。此外，所有海洋菌株萃取液在血管舒張活性 (vasorelaxing activities) 上，利用Phenylephrine誘發大鼠 (Sprague-Dawley Rat) 胸主動脈血管收縮，再以細菌醱酵液萃取物進行處理，得知其中2株菌之萃取物具有抑制血管收縮的活性，分別為#M1B (P. aeruginosa) 和#MO6 (B. firmus)。隨後將上述三株海洋菌以PY培養基擴大培養，針對其代謝物進行一系列的分析、分離、純化與結構解析，計分離出15個化合物，包括: 兩個喹林生物鹼 (quinoline alkaloide)、兩個吩嗪生物鹼 (phenazine alkaloids)、五個芳香胺衍生物 (phenylamides derivatives) 、六個環狀雙胺基酸 (diketopiperazines) 和 2-胺基苯乙酯(2-aminophenyl acetate)。分別為: 2-n-heptylquinol-4-one (1)、2-aminophenyl acetate (2)、cyclo-L-Pro-L-Phe (3)、cyclo-L-Tyr-L-Pro (4)、phenazine-1-carboxamide (5)、hydroxyphenazine (6)、N-(2’-Phenylethyl)isobutyramide (7)、2-Ethyl-N-(2’-phenethyl)butyramide (8)、2-Methyl-N-(2’-phenylethyl)butyramide (9)、N-(2’-phenylethyl)isovaleramide (10)、2-heptyl-4-hydroxyquinoline-N-oxide (11)、cyclo-L-Pro-L-Ile (12)、cyclo-L-Pro-L-Val (13)、cyclo-L-Pro-L-Leu (14) 和cyclo-L-Pro-L-Met sulfoxide (15)，其中cyclo-L-Pro-L-Met sulfoxide (15) 是過去未曾報導過的新化合物。這些天然物純質更進一步進行抗菌活性試驗，結果顯示化合物1、5、6和11針對抗藥性金黃色葡萄球菌有明顯的抑制活性，其最小抑制濃度 (minimum inhibitory concentration, MIC) 分別為64、36、36和24 ?慊/ml。另外，細胞毒性檢測的結果顯示，化合物1和11具有顯著的細胞毒性，其對於 NPC-tw01、HCT-116、Jurkat和H661等四株癌細胞的半抑制濃度 (IC50) 範圍介於 7.1 ~ 14.7 ?嵱。