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卵巢癌相關OVTA-1-1002抗原小鼠單株抗體的製備及定性
Other Title
Production and characterization of mouse monoclonal antibody specific reactive with ovarian cancer associated
OVTA-1-1002 antigen
OVTA-1-1002 antigen
Type
thesis
Date Issued
2012-01-20
Author(s)
郭曉芬
Advisor
楊沂淵
Subjects
系所名稱：醫學檢驗暨生物技術學系
Publisher
醫學檢驗暨生物技術學系
Description
學位別：碩士
語文別：中文
指導教授：楊沂淵
共同指導教授：
口試委員：劉柯俊;施能耀;呂思潔;吳雪霞
中文關鍵字：卵巢癌;OVTA-1-1002;單株抗體
語文別：中文
指導教授：楊沂淵
共同指導教授：
口試委員：劉柯俊;施能耀;呂思潔;吳雪霞
中文關鍵字：卵巢癌;OVTA-1-1002;單株抗體
Abstract
為提高卵巢癌的早期診斷準確率，篩選具高度特異性、敏感性的卵巢癌的生物標記及發展檢驗方法是迫切且急需的。本實驗室已利用卵巢癌病人腹水的抗體CA502，從phage diplay peptide library篩選出OVTA-1基因所表現的蛋白質，是卵巢癌腫瘤細胞相關的抗原蛋白。本研究進行OVTA-1-1002 卵巢癌相關的小鼠單株抗體製備研究。首先，利用大腸桿菌表現OVTA-1-1002蛋白質並以SDS-PAGE確認OVTA-1-1002抗原蛋白質分子量，並利用MicroBCA測量OVTA-1-1002蛋白質濃度，之後免疫注射Balb/c小鼠並探討小鼠血清中Anti-OVTA-1-1002多株抗體隨免疫反應時間表現量變化，再取出小鼠脾臟細胞與骨髓癌細胞融合產生Anti-OVTA-1-1002單株抗體，並以MicroBCA測定純化後Anti-OVTA-1-1002單株抗體的濃度以及探討抗原抗體最佳反應濃度。Anti-OVTA-1-1002單株抗體抗原結合利用競爭型酵素免疫分析法評估，並確認Anti-OVTA-1-1002單株抗體分型IgG1 kappa light chain。