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利用生物冷光分析技術建立中草藥快速品質檢驗平台系統
Other Title
A Quality Control Plateform for Fast Detecting Chinese Herbal Medicines by Using Cell-Based Bio-luminesence Analysis
Type
thesis
Date Issued
2010-06-29
Author(s)
張芷瑜
Advisor
吳瑞裕
Subjects
系所名稱:醫學科學研究所
Description
學位別:碩士
語文別:中文
指導教授:吳瑞裕
共同指導教授:
口試委員:林俊茂;黃聲東
中文關鍵字:中草藥;啟動子;生物感測器;報導基因;冷光基因;品質鑑定;快速檢驗平台
語文別:中文
指導教授:吳瑞裕
共同指導教授:
口試委員:林俊茂;黃聲東
中文關鍵字:中草藥;啟動子;生物感測器;報導基因;冷光基因;品質鑑定;快速檢驗平台
Abstract
傳統的中草藥鑑別與品質管制是目前中藥科學化最為關鍵,而且是發展瓶頸的最主要原因。大多是由其外觀、氣味、顏色加以辨識,進一步者會利用植物組織上的特徵,以組織切片或粉末進行顯微鏡檢驗。但是當藥材因為加工處理後其外觀無法辨識時,傳統鑑別方法便無法派上用場。近年來隨著分子生物技術的進步,利用DNA序列的分析技術,觀察生物遺傳物質的特徵,但此技術雖能準確區別藥材間基原的異同,卻不一定能直接反映其中化學成分的變化;而中草藥的品質可能因為產地、採收季節與生長時間而影響到其中的眾多化學成分,目前應用較廣的鑑定方式為利用高效液相層析儀( HPLC )建立中草藥化學指紋圖譜,以分析藥材中的化學成分,將特定的化合物視為某藥材的特徵性物質,然而,現今在中草藥的使用上多為複方,且單一種中草藥中便含有多種化學成分,若以特定的化合物作為藥材的指標性成分,仍無法實際的反應出中草藥在生物體內的真正療效,且由於上述的方式過程繁複且所需時間長,無法真正的因應中草藥品種鑑定與品質管理實際需求。因此,本研究計畫為能實際觀察中草藥對於生物體所產生的作用,利用生物感測器的模式,發展出一套快速的中草藥檢驗帄台系統,透過大腸桿菌( E. coli )中啟動子針對不同中草藥的不同反應作為中草藥品種及品質的鑑定。本實驗利用基因轉殖技術,將31種啟動子( promoter )個別與帶有冷光基因( luxCDABE )之無啟動子質體( promoterless vector )進行轉殖,再與大腸桿菌進行轉形,將轉形後的菌種加入中藥萃取物或是其指標成分,藉由各類中草藥對於不同啟動子( promoter )產生直接或間接的影響,造成大腸桿菌所產生之生物冷光的變化不同,以此建立各類中草藥萃取物固定的冷光圖譜,進而快速檢驗中草藥的來源及種類。