類鐸受體於粥狀動脈硬化之角色及其於缺血性腦中風之訊息傳遞路徑研究

粥狀動脈硬化是一種慢性發炎性的疾病，其中內皮細胞與單核球都有參與這個過程。單核球與內皮細胞的附著需要靠附著因子的表現，例如血管細胞附著分子1。類鐸受體4已經在粥狀硬化斑塊中有表現，而這樣的血管硬化過程中附著分子的表現增加是經由NF-kB的調控的。 在第一個實驗中，我們想要了解類鐸受體4對於內皮細胞附著分子表現的影響以及類鐸受體4對單核球與內皮細胞附著的影響。我們發現不論在mRNA或者是蛋白質，LPS可以導致內皮細胞血管附著分子1的表現增加，而這樣的表現增加卻可以被抗類鐸受體4的抗體所減弱。同時單核球與內皮細胞的附著可以因LPS的促發而增加，但是這個附著的增加也可以被抗類鐸受體4與抗血管細胞附著分子1的抗體所減弱。因此我們下了一個結論就是類鐸受體4的配體LPS，經由類鐸受體4使得內皮細胞的血管細胞附著分子1表現增加，而且會影響到單核球與內皮細胞的附著，因此我們認為類鐸受體4及其下游路徑可能對於粥狀動脈硬化扮演了重要的角色。
過去的研究證據顯示類鐸受體參與了動脈硬化與缺血性腦中風的過程，但是缺血性腦中風患者的類鐸受體基因的表現卻從未被研究過，在我們的第二個實驗中，我們測量了缺血性腦中風患者周邊血液的類鐸受體2, 3, 4 mRNA相對於控制組的表現情形。結果我們發現缺血性腦中風患者的周邊血液中類鐸受體4的mRNA表現有增加，但是類鐸受體2, 3的mRNA則無增加的現象。我們同時也去測量IL8這個與動脈硬化有關且又是類鐸受體4下游分子的基因表現，結果發現IL8的mRNA表現是下降的。進一步分析起來，我們所有的缺血性腦中風患者都有使用阿斯匹靈作為缺血性腦中風的次級預防，而阿斯匹靈在過去就被證實可以抑制NFkB，而NFkB又可以調控IL-8的表現增加。因此我們推測缺血性腦中風因為類鐸受體4表現增加所引發的發炎反應是可以部份的被阿斯匹靈所抑制。
根據我們第二個研究的結果顯示類鐸受體4在缺血性腦中風患者的表現是增加的，然而，缺血性腦中風患者類鐸受體4下游的路徑在過去並未被研究過，因此，在我們第三個實驗中，我們從第二個研究中的疾病組與控制組中各別選取了類鐸受體4表現最高的12位個案，分別測試類鐸受體4下游路徑的基因在兩組中是否出現差異，並且我們使用這些有表現差異的基因來做下游路徑的分析，並進一步藉由KEGG Mapper來視覺化這個路徑。我們發現缺血性腦中風的患者其類鐸受體4的下游路徑走的是非MyD88的路徑，UBE2V1-TRAF6以及TRAF6可能是缺血性腦中風最重要的基因表現路徑與下游目標分子。我們的結論是，通過我們使用的研究策略，我們更進一步的證實了缺血性腦中風患者類鐸受體4的下游路徑，也為未來的研究或臨床治療找到了可以介入的目標分子。