Honokiol 抑制血小板凝集作用之機轉探討

Honokiol，木蘭科落葉喬木植物厚朴之樹皮所萃取，並運用在傳統中醫藥材，其主要功效有減緩發燒、頭痛、抗焦慮及止瀉等。近期研究指出honokiol具有抗腫瘤、抗發炎、抗氧化、抗菌、抗血管新生和神經保護活性。然而，在人類血小板中，honokiol是否參與的抗血小板活性機制仍不明。
在本篇研究中，我們證實honokiol (0.6-1 μM)會抑制由collagen (1 μg/ml)所誘導的血小板凝集反應和血小板內部鈣離子及ATP的釋放，而其他血小板活化劑，如arachidonic acid (AA, 60 μM)、thromboxane B2 analogue (U46619, 1 μM)及thrombin (0.05 U/ml)則不會影響血小板凝集。另外，使用??2??1刺激劑(aggretin, 1 μg/ml)和醣蛋白(GP) VI刺激劑(convulxin, 5 ng/ml)，發現honokiol具有專一性的抑制由醣蛋白(GP) VI參與的血小板凝集。並且，honokiol能減少由醣蛋白(GP) VI刺激劑(convulxin, 5 ng/ml)所誘導的Lyn、PLCγ2、PKC、p38 MAPK、ERK、JNK和Akt蛋白的磷酸化。除此之外，透過SPR、流式細胞儀和免疫沉澱法的實驗證實，honokiol會結合到GP VI上，進而影響GP VI訊息傳遞路徑下游中的Lyn的活性。另一方面，我們也利用血小板功能分析儀測試honokiol在全血中是否影響血小板凝集功能，發現honokiol (10 μM)有延長血栓形成時間的現象發生。
總結以上實驗結果，honokiol藉由干擾GP VI與Lyn之間的連結，進而抑制GP VI活化路徑中Lyn的活性，並且抑制GP VI訊息傳遞下游之路徑，包括：PLCγ2、PKC、p38 MAPK、ERK、JNK、Akt蛋白的活性。因此honokiol可藉由影響血小板GPVI訊息傳遞路徑，最終抑制血小板的活性及凝集作用。因此，honokiol可專一性的與血小板上的GPVI進行交互作用，可作為GPVI的抑制劑，並且能有助於抗血栓之形成，可望用於預防或治療血栓性疾病。