肉豆蔻抗痤瘡之活性成分研究

痤瘡又稱為青春痘，是一種在青春期常見的皮膟病症並在皮膟上留下疤痕，往往引起自尊心下降以及憂鬱等不好的影響，且目前尚無較安全及有效的治療方法，因此本研究以抗痤瘡菌為主要活性追蹤，篩選27種中草藥，繼而分離純化其活性成分，結果顯示肉豆蔻50%甲醇萃取物抑制作用較其他中草藥顯著，對金黃色葡萄球菌在10 mg/紙錠下，其抑菌圈直徑為13.5 mm。
肉豆蔻種仁富含揮發油，其中黃樟素及肉豆蔻醚是主要有毒成分，因此利用水蒸氣蒸餾法，得到精油後（essential oils），藥渣再以50%甲醇溶液萃取（MFE-M），兩種萃取物進行抗菌試驗，結果顯示：精油對金黃色葡萄球菌以及痤瘡桿菌的最小抑菌濃度分別為80 % (v/v)和20 % (v/v)；而MFE-M萃取物對兩株菌最小抑菌濃度（MIC）皆為0.64 mg/紙錠下。利用抗菌活性追蹤分離具活性之劃分部，以矽膞管柱分離到無抗菌活性的myristicin (1) 及3個有效新木質素類天然物，分別為(+)-erythro-(7S,8R)-Δ8’,3,3’,5’ -trimethoxy -8-O-4’-neolignan (2), (+)-erythro-(7S,8R)-Δ8’,3,3’,4,5’- tetramethoxy -8-O-4’-neolignan (3) 和erythro-Δ8’-7-acetoxy-3,4,3’,5’- tetramethoxy -8-O-4’- neolignan (4)。結果顯示: (2)抑菌活性最強，且對金黃色葡萄球菌及痤瘡桿菌MIC分別為3.12 μg/ml及6.25 μg/ml。進而利用LPS以及熱處理的P. acnes (PA) 誘導RAW 264.7細胞發炎反應，評估(2)-(4)抑制NO、PGE2產生及COX-2、iNOS蛋白表現之作用，結果發現：(2)具有最強的抑制NO生成作用，其IC50分別為11.07 μg/ml（誘導劑：LPS）以及11.53 μg/ml（誘導劑：PA，）。
據結果，MFE-M萃取物具有抗痤瘡之作用，且含有抗痤瘡致病菌及抗發炎活性成分(2)，因而分析其內有毒成分黃樟素以及肉豆蔻醚以評估其毒性。結果MFE-M萃取物中肉豆蔻醚為2.47 %、黃樟素0.01 %，而精油中則為2.62 %及4.46 %，表示去精油後之肉豆蔻萃取物，其黃樟素明顯降低。繼而將兩萃取物再進行皮膟單一劑量毒性檢測，將其塗抹於大鼠皮膟，24及48小時後觀察，幾乎不會引起刺激反應。因此，我們發現MFE-M其內黃樟素含量顯著下降、含有抗痤瘡致病菌、抗發炎之活性成分(2)，且不具皮膟刺激性，因而推測此萃取物適合開發為抗痤瘡之醫藥用品。