花生四烯酸對人類血小板所產生氫氧自由基之探討

過去由Daljeet et al等人使用14CO2 quantification 技術研究指出，花生四烯酸能使血小板產生氫氧自由基，但其使用的是間接的方法測定自由基的含量。因此本實驗的目的是以直接的方式─電子順磁共振儀 (ESR) 測定花生四烯酸是否能使血小板產生氫氧自由基，並進一步探討其詳細機制。在初步實驗中，於電子順磁共振 (ESR) 中，以DMPO (5,5-dimethyl-1-pyrrolin-N-oxide)當補捉自由基試劑，我們發現低濃度花生四烯酸會促進血小板產生氫氧自由基。花生四烯酸的代謝有三種途徑可能產生氫氧自由基，即Lipoxygenase，Cyclooxygenase，NADPH oxidase之路徑。本實驗進一步探討發現低濃度花生四烯酸在血小板中產生的氫氧自由基是經由12-lipoxygenase pathway而來的。除此之外，本實驗還以此一系統測試一些天然抗氧化物例如：resveratrol, rutin, quercetin，及lycopene等。研究顯示能有效地清除低濃度花生四烯酸促進血小板產生的氫氧自由基。然而我們發現當12-lipoxygenase被抑制時，會產生另一種自由基為g = 2.006 自由基，此自由基的產生是因高濃度的peroxides使得中間自由基產物的累積，進而產生自我的摧毀現象。因此，我們認為此一系統可成為新的包含細胞的抗氧化實驗模式。