CCAAT/ Enhancer Binding Protein β 訊息路徑參與Thrombin誘導肺部上皮細胞IL-8/CXCL8表現之探討

Thrombin是一種serine蛋白酶，為已知凝血因子，會從受傷的血管釋放出來，且在肺部的發炎也扮演著很重要的角色。IL-8/CXCL8是ㄧ種嗜中性趨化因子，在氣喘病人中參與調節發炎細胞的移動。先前的研究顯示CCAAT/enhancer binding protein β (c/EBPβ) 在調控呼吸道發炎基因的表現扮演著重要的角色。我們先前的研究證明，thrombin可經由PKCalpha/c-Src和Rac/PI3K/Akt調控NF-κB的路徑來誘導肺部上皮細胞IL-8/CXCL8的表現。本論文將深入探討MEKK1、ERK、RSK1及c/EBPbeta等訊息傳遞在thrombin誘導人類上皮細胞IL-8/CXCL8表現所扮演的角色。我們結果顯示，thrombin誘導IL-8/CXCL8 釋放以及IL-8/CXCL8-luciferase活性可受到c/EBPβ siRNA及細胞轉染c/EBPbeta單點突變所抑制。再者，thrombin誘導IL-8/CXCL8 釋放以及IL-8/CXCL8-luciferase活性也可受到MEKK siRNA、PD98059 (MEK抑制劑)及RSK1 siRNA所抑制。Thrombin可誘導增加c/EBPβ磷酸化及c/EBPβ-luciferase活性。Thrombin誘導c/EBPβ磷酸化和c/EBPβ-luciferase活性會受到MEKK1 siRNA、PD98059及RSK1 siRNA所抑制。Thrombin可誘導增加RSK1磷酸化，且會受到MEKK1 siRAN及PD98059抑制。Thrombin可促使c/EBPβ結合於IL-8/CXCL8 promoter上。綜合以上所有結果，我們首次發現在人類肺部上皮細胞中，thrombin經由活化MEKK1/ERK/RSK1訊息傳遞路徑，誘導c/EBPβ的活化且與IL-8/CXCL8的promoter結合，進而促使IL-8/CXCL8的表現及釋放。