探討以Quercetin及Luteolin對尼古丁誘導乳癌細胞株 ( MDA MB - 231 ) 增生的影響

中文摘要
( Abstract in Chinese )

許多文獻指出吸煙是引發肺癌的重要因子之一。在本實驗室之前的研究發現尼古丁受體 α9在尼古丁所誘發的乳癌中可能扮演著重要的角色。本研究主要目的是探討乳癌、尼古丁、以及天然化合物之間的關連性。MDA MB-231乳癌細胞株是雌性激素接受體陰性。而純化天然化合物 Quercetin 及 Luteolin 存在於一般日常生活常食用的蔬菜水果中，可抑制癌症細胞生長及許多訊息傳遞路徑的蛋白質表現。因此在本實驗中欲觀察在MDA MB-231給予Quercetin 及 Luteolin後是否能抑制尼古丁所誘發的尼古丁受體 α9表現量增加。
在MDA MB-231細胞株中， Nicotine隨著劑量增加會促使其增生，並使得其nAchR α9 mRNA及蛋白質表現量增加。而Nicotine影響nAchR α9 mRNA的表現會較蛋白質表現時間短。在MTT assay，或是RT-PCR及Western blot的實驗中，合併使用天然化合物 Quercetin 及 Luteolin，MDA MB-231細胞株的生長、nAchR α9 mRNA及蛋白質表現量均較單獨使用抑制效果為佳，儘管加入Nicotine也是如此。而在訊息傳遞方面，合併使用效果也較單獨使用更可以抑制Nicotine引起與PI3K/Akt傳遞路徑、MAPK傳遞路徑相關的蛋白質表現量。另外在細胞週期方面，Quercetin 及 Luteolin 能抑制細胞週期G1/S的調控蛋白cyclin D1的表現量，單獨使用或合併使用都有抑制效果，但兩者差別並不明顯。
藉由 Luciferase assay 實驗中發現 Quercetin 及 Luteolin 可抑制因為Nicotine 所誘導的nAchR α9 promoter活性。而模擬活體實驗的Soft agar assay中也可以觀察到 Quercetin 及 Luteolin 在單獨或混合使用皆可抑制MDA MB-231細胞株形成colony的能力。