甾體皂苷誘導膀胱癌細胞凋亡之藥理機制探討

膀胱癌是全球十大癌症之一，依據腫瘤侵襲程度分為非肌肉侵襲性（non–muscle Invasive Bladder Cancer, NMIBC）及肌肉侵襲性膀胱癌（muscle Invasive Bladder Cancer, MIBC）。目前NMIBC中最常見的治療方式為經尿道膀胱腫瘤切除術（transurethral resection of bladder tumor, TURBT），然而患者仍面臨較高的復發風險或預後不佳等臨床挑戰。近年來，天然藥物在癌症治療中的潛力受到廣泛關注。Dioscin為中草藥中提取的類固醇皂苷化合物，已被證明具有抗炎、抗纖維化和抗肥胖等多種生物活性。然而，關於Dioscin作用於膀胱癌細胞中之之抗癌作用及其分子機制，相關研究仍相對有限。因此本研究著重於Dioscin對膀胱癌的抗癌活性及分子作用機制探討。實驗結果證實，Dioscin可顯著抑制膀胱癌細胞之存活率，且相較於癌細胞，對正常細胞之細胞毒性較低。此外，Dioscin 可能透過調控上皮－間質轉換（epithelial–mesenchymal transition, EMT）相關機制，抑制癌細胞之遷移能力。進一步分析顯示，Dioscin可使膀胱癌細胞停滯於sub-G1期，並誘導細胞凋亡相關蛋白質之表現 (caspase 3、8、9、PARP以及 γ-H2AX)，而此凋亡活化途徑為caspase依賴性的細胞凋亡路徑，且透過Dioscin誘導活性氧（reactive oxygen species, ROS）生成而導致細胞凋亡。此外，本研究亦探討 Dioscin 對細胞自噬之影響。結果顯示，隨著 Dioscin 濃度增加，自噬相關蛋白 LC3B II 及 p62 表現量上升，並於細胞內形成 p62 點狀結構（puncta），同時 LC3 螢光訊號亦顯著增強。進一步利用不同自噬抑制策略評估其在 Dioscin 抗癌作用中的角色，結果顯示溶酶體抑制劑Chloroquine可增強 Dioscin 誘導之細胞凋亡效果；而敲除自噬相關基因 ATG5 並未顯著影響 Dioscin 所誘導之細胞凋亡反應。值得注意的是，於細胞內 knockdown p62 可穩定抑制 cleaved caspase-3 之表現。綜合以上實驗結果，Dioscin 具備多重抗膀胱癌作用機制，顯示其作為未來膀胱癌治療潛力藥物之可行性與研究價值。