HLA基因型的多型性與B型肝炎病毒感染及B型肝炎疫苗反應性的研究

急性B型肝炎病毒(hepatitis B virus, HBV)感染後，因為個體的免疫反應因素，可能產生自發性的病毒廓清而痊癒；或發展成持續性感染的慢性帶原者。疫苗是預防HBV感染的一種重要方法，但是，在接受B型肝炎病毒疫苗(HB vaccine)後，仍有將近5-10 % 的人對 HB vaccine 的 反應很差或沒有反應。人類白血球抗原系統(human leukocyte antigen system, HLA) 是參與及連結免疫反應的重要成份，我們提出假說 : 個體對於B型肝炎病毒廓清或持續性感染及對於B型肝炎病毒疫苗的免疫反應，具有高多型性(polymorphic)的HLA 基因，是重要的決定因子。
這個題目分成兩個研究子題: (i) HBV 感染後的研究，我們收集了 434名醫學中心的器官捐贈者或受贈者，時間從 2001年一月至2007年九月。個案必須確認有B型肝炎病毒感染史，然後區分成兩組: 慢性帶原者(Chronic Carrier Group “CC”)和自發性廓清(Spontaneously Cleared Group, “SC”)。慢性帶原者16名，定義是B型肝炎病毒表面抗原(hepatitis B surface antigen, HBsAg) 陽性至少6個月以上。自發性廓清者70名，是指 HBsAg 陰性及 B型肝炎病毒表面抗原的抗體(antibodies to HBsAg, Anti-HBs) 和B型肝炎病毒核心抗原的抗體(antibodies to hepatitis B core antigen, Anti-HBc)皆為陽性者。而且我們也刪除了HBsAg 陰性及Anti-HBs陽性，但是Anti-HBc陰性的個案。(ii) 疫苗反應的研究，包含121 個案(48名醫院健康工作者和73名大學院校學生)，他們接受三劑 20 ug/ml B型病毒肝炎疫苗(Engerix B Hepatitis B Recombinant Vaccine). 每一個個案在疫苗前後皆用穩定的商品化分析試劑(VITROS Eci Immunodiagnostic System)分析 HBs Ag, Anti-HBs 和Anti-HBc。每一個案皆用Viogene Blood and Tissue Genomic DNA Extraction Miniprep System 從200 ul 的血液樣本中萃取DNA，並用商品化的 PCR-reverse SSOP分析試劑(PCR-reverse SSOP HLA typing Kit , Dynal Bioteck Ltd. U.K)執行 HLA-A, -B and -DR 分型。統計分析用Chi-square 和 Fisher exact test 等方法適當的比較分析類別變數，P值小 0.05 視為有統計學上的顯著差異。
在HBV感染後的研究, 有16個個案符合慢性帶原者(Chronic Carrier Group “CC”)，符合自發性廓清(Spontaneously Cleared Group, “SC”) 有70個個案。疫苗反應的研究，收集121未曾暴露於B型肝炎病毒(HBV-naïve)的人，執行 3 劑B型肝炎疫苗後，有15人為疫苗不反應者(nonresponders, Anti-HBs <10 mIU/ml)，其餘的106人是疫苗有反應者(responders, Anti-HBs ≥ 10 mIU/ml)。接著分別分析全部樣本的HLA A, B 和 DR基因位點，用具有HLA基因序列不同型別特異性的寡核甘酸探針組(sequence-specific oligonucleotide probe hybridization)進行雜交分型。相較於自發性廓清者，慢性帶原者中HLA-DRB1*09有顯著的頻率增加(28.13% versus 4.86%, , OR=4.58, 95% CI: 1.53-13.68, p=0.003). 相較於疫苗有反應者，在無反應者中，有顯著的頻率增加有 HLA-B*55 (16.67% versus 4.72%, OR=4.04, 95% CI: 1.10-14.32, p=0.033)和HLA DRB1*04(36.37% versus 17.45%, OR=2.74, 95% CI 1.11-6.92, p=0.026)。
HLA-DRB1*09和持續B型肝炎慢性感染相關；而HLA-B*55 and HLA DRB1*04 有較高B型肝炎疫苗的不反應風險。在這個研究中，由於受限於研究的樣本數量，或許仍有些可能相關的HLA基因位點無法釐清。