All trans-RETINOIC ACID 對於鼻咽癌細胞株之生長控制影響以及合併化療藥物治療之效用

目的:
Retinoids是一群存在於自然界或是人工合成的維生素A的類似物，其中包括了retinol、 isotretinoin、 tretinoin(ATRA)、 retinylpalmitate、 Fenretinide(4-HPR)、 etretinate， arotinoids等等。 此類化合物在許多的動物實驗上，對於許多上皮組織 (包括口腔， 皮膚， 膀胱， 攝護腺和乳腺) 表現出明顯抑制癌化的效果。 近年來各種維他命A的代謝衍生物更被運用到其他類型的癌症上試圖提供更好的腫瘤治療效果。
將ATRA運用在頭頸部鱗狀細胞癌不論是在細胞株的試驗或是動物實驗上已經得到具體的成果，進一步的人體試驗同時也在不同的國家進行當中。 甚至於在一些國家，對於頭頸部鱗狀細胞癌症的治療已經將ATRA納入了原本的化療配方組合之中。 然而，同屬於源自上皮細胞組織的鼻咽癌，卻仍然缺少對於這類促細胞分化藥物的反應研究。
本實驗計畫希望透過ATRA合併使用現有治療鼻咽癌化療藥物Cisplatin，以鼻咽癌細胞株作為實驗材料，試圖找出ATRA對於鼻咽癌細胞的影響，以及合併使用Cisplatin是否具有加成的治療效果。


方法:
實驗材料為兩株本土鼻咽癌細胞株 NPC-TW01以及 NPC-TW04。 各別於不同濃度之ATRA培養下，在光學顯微鏡下觀察細胞型態學的變化，並測量個別之生長曲線。 最後將細胞株分別培養於混有不同濃度的cisplatin、ATRA、以及兩者藥物合併的培養液中，選定6天之生長期，以MTT assay光學方法測光密度OD值來估算細胞的數目。

結果:
NPC-TW01細胞株在單獨使用Cisplatin 0.5μmol/L 開始產生細胞生長抑制，並且隨著加入藥物的濃度增加而有加強。 單獨使用ATRA 1μmol/L生長開始產生抑制，然而對於細胞生長的抑制作用並未能隨著ATRA濃度的增加而加強。 而NPC-TW04細胞株則對個別使用Cisplatin以及ATRA的反應相較之下明顯變差。
在合併使用的效用上，兩者皆有著顯著的加成效果。 NPC-TW01在ATRA在合併較低濃度的cisplatin之下，對細胞生長抑制的作用與單獨使用ATRA並沒有差異。 然而當cisplatin的濃度達到5μM的時候，合併ATRA 1μM比起對照組可以造成吸光值平均下降至23.7%。 比起單獨使用cisplatin 5μM 以及單獨使用ATRA 1μM，細胞抑制的差異皆可達到統計上的意義。 NPCTW04的反應也有類似的結果，當cisplatin的濃度提升到1 μM以上的時候，加入原本合併使用時反應不甚明顯的最低濃度的ATRA 1μM，就可以達到大幅下降吸光值的效果。

結論:
ATRA對於本實驗中的兩株鼻咽癌細胞株皆有抑制生長的作用，此外當合併使用cisplatin時可以於低濃度就達到良好的加成效果，顯示出ATRA作為鼻咽癌合併治療藥物的潛力。 但是由於在合併cisplatin以及ATRA治療下，腫瘤的抑制加成效果須依賴一定的cisplaitn濃度，而且並未能隨同ATRA的濃度增加而更加明顯。 因此除了同時使用cisplain與ATRA預期可以達到相當好的鼻咽癌合併治療效果之外，若能加入經由不同機轉作用的抗癌藥物，應能進一步再提高療效。