利用匍枝根黴菌(Rhizopus stolonifer)細胞壁組成RHIZOCHITIN作為生物支架探討生物降解性及生物相容性

本研究利用延緩孢子產生的突變Rhizopus stolonifer F6菌株，經液體培養基培養得到海綿狀的菌絲墊。此菌絲利用1N NaOH 在121oC處理20分鐘後凍乾得到的物質稱為RHIZOCHITIN (RC)。RC再經95%酒精沖洗，以去除非皂化的酯類後得到的物質稱為alcohol-treated RHIZOCHITIN (ARC)。市售的正向控制組BESCHITIN-W (BC)與RC和ARC作為生物支架分別進行體外和體內的生物相容性和生物降解性測試。體外測試包括溶菌酶分解和纖維母細胞(L-929)培養，分別看生物支架前後重量改變與顯微鏡觀察(光學顯微鏡與電子顯微鏡)結構前後是否不同，得知溶菌酶在前三週RC和ARC材料重量減少明顯比BC還要少，表示RC和ARC不會很明顯的被溶菌酶分解，反之BC就明顯的被分解，在SEM中也可看到三者結構的改變。RC和ARC不會影響纖維母細胞的存活，並且在細胞培養中也可以發現，RC和ARC材料重量減少，可知L-929會對RC和ARC產生分解作用，但是BC不僅會降低L-929存活率外，而且只可以分解少許的材料。體內研究證明將RC和ARC植入SD大鼠皮下組織發現在兩週已完全被分解，然而BC在四週時還可被取出，表示BC在體內分解速度慢於RC和ARC。實驗中RC、ARC和BC植入皮下組織均不會造成皮膚過敏和刺激性現象產生。最後，在植入後四週，利用直徑為8 mm大小的鑽孔器，在植入的區域取出組織，進行HE和PAS染色，兩者結果均顯示RC和ARC在體內被分解的速度遠大於BC。本研究得知從R.stolonifer F6細胞壁組成成分的物質，是具有生物相容性與生物降解性。