端粒酶在Amyloid beta造成細胞凋亡之角色探討

Amyloid beta peptide (Abeta)沉積在腦部產生老化瘢塊(senile plaque)為造成阿滋海默症(Alzheimer's disease , AD）的主要原因之一，先前研究指出A?狾陳鄐O誘導細胞凋亡，然而其細胞凋亡機轉仍尚未明白。本實驗中Abeta25-35、Abeta1-40 能有效誘導U87-MG，C6 glioma，Neuro-2a 及murine cerebral endothelial cells(CECs)走向細胞凋亡，相反的，Abeta1-16、Abeta35-25並無此活性，以Telomeric Repeats Amplification Protocol (TRAP)測定端粒酶 (telomerase)活性發現Abeta25-35、Abeta1-40處理下隨著處理濃度增加而抑制細胞內端粒酶活性，同時活化細胞凋亡路徑，包含增加Bax蛋白、抑制 Bcl-2蛋白、誘導caspase3、PARP、D4-GDI的蛋白質降解等，這些情形並無法發現在Abeta1-16、Abeta35-25處理下的細胞。當以TERT siRNA抑制TERT蛋白表現時會增強Abeta25-35對CECs造成的細胞毒性。先前研究指出Heat shock protein 90(HSP90)蛋白在調控端粒酶活性上扮演重要角色，我們發現Abeta25-35處理能降低CECs中HSP90蛋白及其client proteins包含Akt、TERT、Cdk4及p53蛋白表現。以HSP90的抑制劑geldanamycin (GA)、radicicol (RD)處理能促進Abeta25-35所引起的端粒酶活性下降與細胞毒性。同時Abeta25-35 抑制細胞內磷酸化Akt蛋白表現，以PI3K/Akt的抑制劑LY294002可降低端粒酶活性與促進Abeta25-35引起細胞凋亡。進一步分析Abeta25-35 誘導HSP90蛋白下降的原因，我們發現Abeta25-35 處理會增加細胞內蛋白質被Ubiquitination的程度，在蛋白酶抑制劑MG132處理下，Abeta25-35所降低端粒酶活性、TERT蛋白及HSP90蛋白表現的情形能顯著被抑制。因此推論降低HSP90蛋白表現進而抑制端粒酶活性在Abeta誘導細胞凋亡過程中扮演重要角色。