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開發去細胞軟骨基質與表層包覆玻尿酸之膠原蛋白基質以作為人工軟骨的支架
Other Title
Development of Acellular Cartilage Matrix and HA Coated Collagen Matrix as the Scaffold for the Artificial Cartilage
Type
thesis
Date Issued
2007-07-17
Author(s)
張曉婷
Advisor
許明照
Subjects
系所名稱:藥學研究所
Description
學位別:碩士
語文別:中文
指導教授:許明照
共同指導教授:
口試委員:林山陽;蔡義弘;蘇慶華
中文關鍵字:去細胞軟骨基質;表層包覆玻尿酸之膠原蛋白基質
語文別:中文
指導教授:許明照
共同指導教授:
口試委員:林山陽;蔡義弘;蘇慶華
中文關鍵字:去細胞軟骨基質;表層包覆玻尿酸之膠原蛋白基質
Abstract
本篇論文的目的,是希望能研發出新的人工軟骨以供治療軟骨疾病,所使用的材料支架有兩種,分別是以豬軟骨基質及自豬皮萃取而得的膠原蛋白基質為主體,再經之後不同的處理。在軟骨基質方面,使用了三種酵素,進行不同時間、溫度的處理,希望找出最佳的去細胞方法,並以H&E stain、nested PCR、fluorimetric DNA assay評估去細胞程度;在膠原蛋白基質方面,使用兩種添加玻尿酸的方式,希望添加對軟骨細胞的生長有利的玻尿酸,並分析物理性質,最後再將軟骨細胞植入這兩種材料支架中培養,並觀察軟骨細胞的生長表現。我們以MTT assay觀察細胞在不同時間的生長量,也以H&E stain觀察細胞在基質中的分布,再以RT-PCR的方式分析細胞的mRNA表現,另一方面,則是將去細胞基質植入老鼠體內以評估其生體相容性。
結果顯示,以玻尿酸酶加胰蛋白酶或分解酶加胰蛋白酶,併用界面活性劑處理24小時,能有效去除細胞;使用表層包覆玻尿酸的方式,可得到較堅實的膠原蛋白基質結構,但孔洞直徑會隨玻尿酸量的增加而減少;而兩種材料支架都具孔洞性適合細胞生長。目前已將軟骨細胞植入,但有關觀察細胞生長的實驗,及去細胞基質的生體相容性實驗,仍在進行中,期望細胞在兩種材質內都能有良好的生長表現。
結果顯示,以玻尿酸酶加胰蛋白酶或分解酶加胰蛋白酶,併用界面活性劑處理24小時,能有效去除細胞;使用表層包覆玻尿酸的方式,可得到較堅實的膠原蛋白基質結構,但孔洞直徑會隨玻尿酸量的增加而減少;而兩種材料支架都具孔洞性適合細胞生長。目前已將軟骨細胞植入,但有關觀察細胞生長的實驗,及去細胞基質的生體相容性實驗,仍在進行中,期望細胞在兩種材質內都能有良好的生長表現。
File(s)
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Name
C0183590.pdf
Size
13.45 MB
Format
Adobe PDF
Checksum
(MD5):981690309cee75cb52706345c8c44556