蕭伊倫柯宜珊2026-09-092026-09-092026-07-16https://handle.ncl.edu.tw/11296/23ya57https://203.71.86.71/handle/123456789/74524學位別:碩士 語文別:中文 指導教授:蕭伊倫 口試委員:侯又禎; 洪偉倫; 劉于榕; 蕭伊倫 授權範圍:網際網路,開放日期為2027-07-27 電子論文連結:https://handle.ncl.edu.tw/11296/23ya57由於奈米微塑膠(1-999 nm)廣泛存在於環境與食物中,且人體主要可能經由攝食途徑暴露,因此其潛在健康風險受到關注。然而,目前人體暴露資料多集中於微米級微塑膠,奈米級微塑膠之檢測資料仍相對有限。相較於人體組織,血液樣本具有採集流程成熟且相對容易取得之優勢,並可反映微塑膠是否進入體循環,因此適合作為生物監測檢體。本研究建立光譜式流式細胞儀結合尼羅紅染色之檢測流程,並評估染色條件、背景訊號、粒徑辨識、顆粒數定量能力、不同聚合物反應及血液前處理效能。結果顯示,以6000 nM尼羅紅(Nile Red)、20%二甲基亞碸(Dimethyl sulfoxide, DMSO)於70 °C染色1.5小時,並使用488 nm雷射及552–675 nm放射波段,可使195 nm聚苯乙烯(Polystyrene, PS)與背景訊號區隔。染劑空白經1000倍稀釋後,具有較低之gate內背景事件。本方法可辨識PS 195、503及1040 nm,混合粒徑樣品中195–1040 nm PS之檢測率為98.8–104.8%;在不含血液之PS標準品系統中,PS 195 nm於上機濃度10^4–10^6顆/mL之檢測率為99.6–104.9%,顆粒數定量下限為10^4顆/mL,換算回原始染色液為10^7顆/mL。不同聚合物之檢測率亦有差異,聚甲基丙烯酸甲酯(Poly(methyl methacrylate), PMMA)及三聚氰胺甲醛樹脂(Melamine formaldehyde, MF)之檢測率分別為67.9%及90.2%。血液前處理結果顯示,未添加血液時,四甲基氫氧化銨(Tetramethylammonium hydroxide, TMAH)及蛋白酶K (Proteinase K)搭配過氧化氫(H2O2)流程之503 nm PS回收率分別為91.7%及85.0%;含血液時回收率明顯下降,其中以Proteinase K處理0.25 mL血液之回收率最高(46.5%)。整體而言,本方法可用於奈米微塑膠之快速篩檢、顆粒數分析及相對粒徑判讀,但血液基質仍會造成回收損失,後續仍需進一步優化前處理流程。系所名稱:食品安全學系碩士班流式細胞儀結合尼羅紅染色法檢測人類血液中食品相關奈米微塑膠之方法開發Method Development of Food-Related Nanoplastics in Human Blood Using Flow Cytometry Combined with Nile Red Stainingthesis