黃彥華邢睿謙2026-09-092026-09-092026-07-09https://handle.ncl.edu.tw/11296/4fr9fahttps://203.71.86.71/handle/123456789/74478學位別：碩士 語文別：英文 指導教授：黃彥華 口試委員：明智煥; 區慶建; 黃彥華 授權範圍：網際網路,開放日期為2027-07-25 電子論文連結：https://handle.ncl.edu.tw/11296/4fr9fa原發性卵巢功能不全（primary ovarian insufficiency, POI）是育齡女性因卵巢功能過早衰退所導致之不孕症及荷爾蒙失衡疾病。化療所誘發之 POI 尤其嚴重，因化療藥物具細胞毒性，不僅破壞卵泡，亦干擾內分泌與晝夜節律。現行臨床治療以荷爾蒙替代療法（hormone replacement therapy, HRT）為主，僅能暫時緩解症狀，無法修復化療造成之卵巢損傷與晝夜節律失常。本實驗室先前研究證實，胎盤來源間質幹細胞（placenta-derived mesenchymal stem cells, pcMSCs）因表現雌激素受體（estrogen receptor, ER⁺），可回應卵巢雌激素微環境，其細胞分泌體（secretome）具有修復潛力，惟其分子機制仍未明。因此，本研究收集 ER⁺ pcMSCs 經雌二醇（estradiol, E2）刺激後之條件培養液（E2-conditioned medium, E2-CM）及其純化之小型胞外囊泡（small extracellular vesicles, sEVs），探討其改善化療誘導 POI 之治療效果及其關鍵 microRNA 作用機制。首先建立 cyclophosphamide（CTX）誘導之 POI 小鼠模型評估 E2-CM 與 sEV 之治療效果。結果顯示，CTX 處理後雌鼠體重下降超過 15%，產仔數顯著降低，顯示卵巢功能與生殖能力受損；經 E2-CM 或 sEV 治療後，可顯著改善體重、生殖表現及卵泡發育，其中以 E2-CM 組恢復效果最接近正常組。於 in vitro KGN 顆粒細胞模型中，E2-CM 與 sEV 可促進細胞增殖、抑制細胞凋亡，並改善化療造成之晝夜節律相關基因異常表現。生物資訊分析顯示，E2-CM 衍生 sEV 富集之 miRNA 中，以 miR-24-3p 最具調控潛力，其靶基因主要參與細胞衰老、細胞週期、細胞凋亡及晝夜節律等相關路徑。本研究進一步利用 miR-24-3p 模擬物(Mimic) 與 抑制劑 (Inhibitor)，分別於 CTX 誘導之 POI 小鼠及 4-OOH-CP 處理之 KGN 細胞模型進行功能驗證。結果顯示，miR-24-3p mimic 幾乎重現 E2-CM 的治療效果，而 inhibitor 則明顯削弱 E2-CM 與 sEV 的修復能力。miR-24-3p mimic 可改善體重下降、生殖能力降低及卵泡耗竭，促進顆粒細胞增殖、抑制細胞凋亡，並恢復自主活動節律及 PER2、NR1D1 等核心時鐘基因表現。綜合以上結果，證實 miR-24-3p 為 E2-CM 衍生 sEV 發揮治療作用之關鍵效應分子，不僅介導卵巢修復，亦建立卵巢功能重建與晝夜節律恢復之間的重要分子連結。本研究首次證實 ER⁺ pcMSC 衍生 E2-CM sEV 中之 miR-24-3p 為調控卵巢修復及晝夜節律重塑之關鍵分子，不僅闡明 E2-CM/sEV 之作用機制，亦為化療誘導 POI 及晝夜節律失常之病患，提供無細胞再生治療之新的分子標的與臨床轉譯依據。系所名稱：醫學科學研究所碩士班thesis