黃昭蓮施子弼陳奕傑2026-05-122026-05-122008-07-14https://203.71.86.71/handle/123456789/12666https://hdl.handle.net/11296/7nsa7x學位別：碩士 語文別：中文 指導教授：黃昭蓮施子弼 共同指導教授： 口試委員：許祖法;林俊茂;商惠芳 中文關鍵字：類小泛素蛋白轉錄後修飾是調控蛋白質功能及命運非常關鍵的調節者，而 SUMO (Small Ubiquitin-related Modifer) 家族，是其中最重要的成員 之一。被 SUMO 修飾過的蛋白會改變與其他蛋白的相互作用、細胞 內坐落的位置或是生物活性；接下來，被修飾的這些蛋白大部分與細 胞週期、DNA 修補、染色質結構以及轉錄調節有很高度的關聯性。 SUMO 連結途徑中，將 SUMO 從 E1 活化酶轉送到目標蛋白 的 E2 結合酶 -Ubc9，扮演著非常重要的中心角色；可預見的，調節 Ubc9 的活性儼然是 SUMOylation 反應中最顯著的關鍵。近年來， 本實驗室發現 SUMO 不僅僅會與 hUbc9 形成硫脂鍵 (thioester bond)，更會以共價類異胜肽鍵 (isopeptide bond) 的方式連接，簡而 言之：hUbc9 也是 SUMO 的受質之一；此發現促使我去研究修飾後 的hUbc9 扮演甚麼樣的角色。 為此，實驗中利用定位突變 (site-direct mutagenesis) 試著去找出 hUbc9 上跟 SUMO 共價連接的位置，以及製造了SUMO1-hUbc9 融合蛋白 (Fusion protein) 去揣摩 SUMOylated hUbc9 在活性上產 生了什麼樣的變化。在實驗中發現，hUbc9(1-158)(Lys-Arg) (M14)的接 合活性優於Wild-type hUbc9，並且當 SUMO1 接在hUbc9 C 端的 時候，會抑制其酵素活性，但是當位於 N 端時，並不會看到相同 iv 的抑制結果，暗指 hUbc9 C 端的空間對於其活性是非常重要的；根 據過去對於研究，認為 SUMO1 修飾的位置是比較接近 Ubc9 的 C 端。綜合上述實驗數據，本篇大膽假設 SUMO 修飾對於人類 Ubc9 是產生了抑制其活性的功能。系所名稱：醫學科學研究所thesis