張文昌莊健盈蔡瑀庭2026-06-142026-06-142017-07-03https://203.71.86.71/handle/123456789/57912學位別：碩士 語文別：英文 指導教授：張文昌 共同指導教授：莊健盈 口試委員：柯瓊媛;徐宗溢;張光裕 中文關鍵字：多型性膠質母細胞瘤；抗藥性；帝盟多；苯乙酰苯胺羥肟酸；轉錄因子Sp1；轉錄因子Bmi-1 英文關鍵字：Glioblastoma Multiforme;Drug resistance;Temozolomide;Suberoylanilide Hydroxamic Acid;Transcription factor Sp1, Transcription factor Bmi-1前言：多型性膠質母細胞瘤 (GBM)在世界衛生組織的分級中屬於第四級的星狀細胞瘤 (astrocytoma)，是一種非常惡性的腦瘤。儘管目前在治療上有手術切除、放射線治療與化療等方式，但仍無法完全治癒而且產生抗藥性的機率非常高，使得GBM更加難以治療。近年來，GBM幹細胞 (GSCs) 的存在被認為是抗藥性產生的一大主因。其中，文獻證實幹細中的特定基因如Bmi-1的表現量會大幅提升並且參與在藥物抗藥性能力的發展。 方法：在本篇研究中，我們將目標放在乙酰苯胺羥肟酸 SAHA上，SAHA是一個組蛋白去乙醯酶抑制劑。為了探討SAHA如何抑制Bmi-1的表現，我們利用螢光素酶檢測法、 DNA親和性沉澱測定法 (DAPA)和免疫沉澱分析法 (IP) 來探討其中的分子機轉。在動物實驗中，我們將具有TMZ抗藥性的GBM細胞植入老鼠 (SCID mice)背部的皮下並分成兩組，一組給予TMZ另一組給予SAHA加上TMZ。我們觀察這兩組之間的腫瘤大小差異。 結果：在確認所建立的具有TMZ抗藥性的GBM細胞確實對TMZ不敏感後，我們發現SAHA可以有效的抑制這些具有抗藥性的細胞的生長。另一方面，我們發覺相較於一般的GBM細胞，一些在癌症幹細胞中大量表現的特定幹細胞標記也在這群具有TMZ抗藥性的GBM中有增加的趨勢。因此我們認定這些抗藥性的細胞可能具有較多GSCs的能力。所以我們建立了幹細胞的模式並給予SAHA做治療。我們發現SAHA可以抑制GSCs的生長和其幹細胞標記的蛋白質表現量。由於文獻證實轉錄因子Sp1可以調控Bmi-1的表現，我們利用DAPA assay發現SAHA可以抑制Sp1連接到Bmi-1的啟動子。而且IP assay的結果顯示SAHA可以抑制組蛋白去乙醯酶而使Sp1的蛋白質維持在高度乙醯化的狀態。另有文獻證實 Sp1蛋白質的乙醯化程度增加會抑制其連接到DNA的能力。 因此，我們透過以上實驗及文獻證實SAHA增加Sp1蛋白質的乙醯化程度會抑制Sp1連結到Bmi-1的能力進而降低了Bmi-1的表現量。在動物模式中，我們發現經過 SAHA搭配上TMZ的治療後，腫瘤的大小相較於只給予TMZ的組別有比較小的趨勢。 結論：透過SAHA增加Sp1蛋白質的乙醯化程度，可以抑制Sp1連結到Bmi-1的能力進而降低了Bmi-1的表現量。我們的結果提供了在治療具有TMZ抗藥性的GBM腫瘤中，SAHA搭配上TMZ或許是一種新的治療方法。系所名稱：醫學科學研究所thesis