邱士娟蔡俐慧2026-05-142026-05-142013-06-28https://203.71.86.71/handle/123456789/14053學位別：碩士 語文別：中文 指導教授：邱士娟 共同指導教授： 口試委員：江樵熹;何秀娥 中文關鍵字：人類血清白蛋白奈米粒子;反譯寡核苷酸以蛋白質為基質奈米粒子作為藥物載體在目前的研究中相當突出，主要是由於其良好生物安定性及低的毒性。在眾多血清白蛋白中人類血清白蛋白(HSA)由於其無毒性、生物可相容性、不具抗原性及生物可降解性，因此有相當的顯著性。而本次實驗主要是要探討以人類血清白蛋白奈米粒子(HSA nanoparticles)作為反譯寡聚核苷酸(antisense oligonucleotides，ODNs)的運輸載體。 　　本次實驗的HSA nanoparticles (HSA NPs)以退溶法的方式製備，所使用的退溶劑為酒精。在完成退溶反應後，以交聯劑戊二醛(glutaraldehyde)或加熱變性的方式使之安定。本次實驗中，改變許多變因，包括：酒精量的改變、交聯劑量的改變、加熱時間的改變、ODN加入量的改變。乘載ODN之HSA NPs(ODN loaded HSA NPs)以吸附法(adsorption)的方式將ODN吸附在HSA NPs上或以併入法(incorporation)的方式使ODN與HSA分子結合。製備完成的產物以二次水純化，粒子大小、粒子分散性及表面電位以Zetasizer 3000測得。以蛋白質定量的方式評估所形成的HSA NPs量，以TNBS試劑評估未發生交聯反應胺基酸基團量，以波長260 nm評估HSA NPs之ODN乘載量，利用螢光測定的方式測定HSA NPs之釋放趨勢，使用流式細胞儀及雷射共軛焦顯微鏡評估細胞攝入情形，並且以MTS assay評估HSA NPs的細胞毒性。 　　在本次實驗的結果顯示，以退溶法製備的E STIR OVERNIGHT；0.5G粒徑為128.5±3 nm。L-AD STIR OVERNIGHT；0.5G粒徑為174.2±8 nm，乘載能力為88.6±4%。L-IN STIR OVERNIGHT；0.5G粒徑為132.5±16 nm，乘載能力為73.2±6%。安定性於63天內都相當良好。K562細胞在有血清的環境相較於無血清的環境有較佳的攝入HSA NPs能力，在有血清環境下給予6.895 μM的L-AD STIR OVERNIGHT；0.5G 24 HR，能有87.67±6.4%的細胞攝入。給予K562細胞L-IN STIR 1 HR；HEAT 1 HR；0.5G 48 HR 其細胞存活率為74.71±2.8%。 　　整體而言，本次實驗所製成的HSA NPs有相當的安定性且有良好的乘載ODN能力，HSA NPs能順利地被K562細胞攝入。系所名稱：藥學系(碩博士班)thesis