黃豪銘馮聖偉黃芋萱2026-06-142026-06-142018-06-28https://203.71.86.71/handle/123456789/58103學位別:碩士 語文別:中文 指導教授:黃豪銘 共同指導教授:馮聖偉 口試委員:王靜瓊;莊爾元;陳立耿 中文關鍵字:間葉幹細胞、無患子油、骨分化、MAPK pathway 英文關鍵字:mesenchymal stem cells, Sapindus oil, differentiate, MAPK pathway研究背景 幹細胞治療的研究帶來現代醫學治療的新契機,在幹細胞的骨組織工程中,骨髓幹細胞(BMSC)是最常被拿來做研究的,因為它具有大量的細胞且容易分離,然而採集骨髓幹細胞必須侵入性採集,這是做細胞移植的一個限制。因此,要找到代替骨髓幹細胞並且促進骨分化,提高骨再生的成功率是關鍵的問題。人類臍帶間葉幹細胞(WJMSCs)是有潛力的,可代替骨髓幹細胞,WJMSCs取得容易且分化能力很強。無患子屬於無患子科無患子屬,有研究指出無患子具有生物效應,可治療癌症、抗發炎、抗心血管疾病……等,然而無患子油對WJMSCs是否有促進骨癒合效果仍不清楚。 目的 本實驗的目的探討添加無患子油對人類臍帶間葉幹細胞(WJMSCs)增生與分化的影響。 材料與方法 本研究實驗中首先添加不同濃度的DMSO作為乳化劑,進行WJMSCs的細胞活性檢測,並測量DMSO對無患子油的最高溶解度,再分析無患子油對WJMSCs之影響,以流式細胞儀檢測WJMSCs添加無患子油後的表面特徵蛋白。接著進行添加無患子油對WJMSCs骨分化影響之實驗,並探討其訊息傳遞路徑是否與MAPK pathway相關。為了瞭解無患子油中影響骨分化的有效成分,我們將細胞培養於含有骨分化的 培養基中,實驗時以Alizarin Red S solution染色並進行鈣化沉積的定量分析,而導致WJMSC進行骨分化之訊息分子機轉,則以即時定量聚合酶連鎖反應(Real-time PCR)來確認。 結果 從結果發現,當以不同濃度的DMSO作為乳化劑進行細胞活性實驗時,由結果可得知0.2% 的DMSO不會傷害細胞,而不同比例的無患子油與DMSO的最高溶解度為2:5。在DMSO與無患子油的細胞活性與骨分化的實驗中,分別以細胞活性MTT與Alizarin Red S solution染色與定量後,結果發現添加無患子油可促進細胞增生與分化,添加抑制劑則都有抑制骨分化的效果。經由成分分析發現油酸與棕櫚酸是無患子油促進骨分化的重要成分。ALP與OCN在添加無患子油表現量都增加。 結論 從結果得知添加無患子油有促進細胞增生與導致骨分化的效果,其中油酸與棕櫚酸是無患子油促進骨分化的重要成分。此外本研究發現添加無患子油導致骨分化與extracellular signal-regulated kinase (ERKs)、c-Jun N-terminal kinase (JNKs)、p38 MAPK訊息傳導路徑有關。而WJMSC的ALP與OCN基因在添加無患子油後表現量都增加,因此添加無患子油在臨床上有增加骨癒合的趨勢。系所名稱:生醫材料暨組織工程研究所利用無患子籽仁提取物促進間葉幹細胞分化之研究A study on differentiation enhancement of mesenchymal stem cells by Sapindus seed extractthesis